glp1r_human

NAME

5NX2

ORGANISM

Human (Homo sapiens)

PROTEIN NAME

glp1r_human

SOURCE

SWISSPROT

SEQUENCE

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term        
M
A
G
A
P
G
P
L
R
L
10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
A
L
L
L
L
G
M
V
G
R
20
 
 
 
              
                   
A
G
P
R
P
Q
G
A
T
V
30
                   
                   
S
L
W
E
T
V
Q
K
W
R
40
                   
                   
E
Y
R
R
Q
C
Q
R
S
L
50
                   
                   
T
E
D
P
P
P
A
T
D
L
60
                   
                   
F
C
N
R
T
F
D
E
Y
A
70
                   
                   
C
W
P
D
G
E
P
G
S
F
80
                   
                   
V
N
V
S
C
P
W
Y
L
P
90
                   
                   
W
A
S
S
V
P
Q
G
H
V
100
                   
                   
Y
R
F
C
T
A
E
G
L
W
110
                   
                   
L
Q
K
D
N
S
S
L
P
W
120
                   
                   
R
D
L
S
E
C
E
E
S
K
130
                   
              TM1
R
G
E
R
S
S
P
E
E
Q
140
                   
                   
L
L
F
L
Y
I
I
Y
T
V
150
                   
                   
G
Y
A
L
S
F
S
A
L
V
160
                   
                   
I
A
S
A
I
L
L
G
F
R
170
                   
ICL1 TM2      
H
L
H
C
T
R
N
Y
I
H
180
                   
                   
L
N
L
F
A
S
F
I
L
R
190
                   
                   
A
L
S
V
F
I
K
D
A
A
200
           
 
      
            ECL1
L
K
W
M
Y
S
T
A
A
Q
210
 
      
 
          
                   
Q
H
Q
W
D
G
L
L
S
Y
220
                   
      TM3        
Q
D
S
L
S
C
R
L
V
F
230
 
 
                
                   
L
L
M
Q
Y
C
V
A
A
N
240
                   
                   
Y
Y
W
L
L
V
E
G
V
Y
250
                 
 
                   
L
Y
T
L
L
A
F
S
V
L
260
                   
TM4              
S
E
Q
W
I
F
R
L
Y
V
270
                   
                   
S
I
G
W
G
V
P
L
L
F
280
                   
                   
V
V
P
W
G
I
V
K
Y
L
290
       
 
    
 
    
    ECL2        
Y
E
D
E
G
C
W
T
R
N
300
                   
  TM5            
S
N
M
N
Y
W
L
I
I
R
310
                   
                   
L
P
I
L
F
A
I
G
V
N
320
               
 
  
                   
F
L
I
F
V
R
V
I
C
I
330
                   
                   
V
V
S
K
L
K
A
N
L
M
340
                   
TM6              
C
K
T
D
I
K
C
R
L
A
350
             
 
    
                   
K
S
T
L
T
L
I
P
L
L
360
 
  
 
              
                   
G
T
H
E
V
I
F
A
F
V
370
                   
  ECL3   TM7  
M
D
E
H
A
R
G
T
L
R
380
                   
                   
F
I
K
L
F
T
E
L
S
F
390
                   
                   
T
S
F
Q
G
L
M
V
A
I
400
       
 
          
          H8      
L
Y
C
F
V
N
N
E
V
Q
410
                   
                   
L
E
F
R
K
S
W
E
R
W
420
                   
                   
R
L
E
H
L
H
I
Q
R
D
430
   
 
 
 
 
 
 
 
 
  C-term      
S
S
M
K
P
L
K
C
P
T
440
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
S
L
S
S
G
A
T
A
G
450
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
S
M
Y
T
A
T
C
Q
A
460
 
 
 
     
S
C
S
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
GP67 signal
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Strep II    
 
                  
  N-term      
 
R
P
Q
G
A
T
V
S
L
32
                   
                   
W
E
T
V
Q
K
W
R
E
Y
42
                   
                   
R
R
Q
C
Q
R
S
L
T
E
52
                   
                   
D
P
P
P
A
T
D
L
F
C
62
                   
                   
N
R
T
F
D
E
Y
A
C
W
72
                   
                   
P
D
G
E
P
G
S
F
V
N
82
                   
                   
V
S
C
P
W
Y
L
P
W
A
92
                   
                   
S
S
V
P
Q
G
H
V
Y
R
102
                   
                   
F
C
T
A
E
G
L
W
L
Q
112
                   
                   
K
D
N
S
S
L
P
W
R
D
122
                   
                   
L
S
E
C
E
E
S
K
R
G
132
                   
          TM1    
E
R
S
S
P
E
E
Q
L
L
142
                   
                   
F
L
Y
I
I
Y
T
V
G
Y
152
                   
                   
A
L
S
F
S
A
L
V
I
A
162
                   
                   
S
A
I
L
L
G
F
R
H
L
172
                   
ICL1 TM2      
H
C
T
R
N
Y
I
H
L
N
182
                   
                   
L
F
A
S
F
I
L
R
A
L
192
                   
                   
S
V
F
I
K
D
A
A
L
K
202
       
 
      
 
  
        ECL1    
W
M
Y
S
E
A
A
Q
A
H
212
   
 
              
                   
Q
W
R
G
L
L
S
Y
Q
D
222
                 
 
  TM3            
S
L
S
C
R
L
V
F
L
F
232
                   
                   
M
Q
Y
C
V
A
A
N
Y
Y
242
                   
                   
W
L
L
V
E
G
V
Y
L
Y
252
             
 
    
          ICL2  
T
L
L
A
F
S
V
F
S
E
262
                   
TM4              
Q
W
I
F
R
L
Y
V
S
I
272
                   
                   
G
W
G
V
P
L
L
F
V
V
282
                   
                   
P
W
G
I
V
K
Y
L
Y
E
292
   
 
    
 
        
ECL2            
D
E
A
C
W
A
R
N
S
N
302
                   
TM5              
M
N
Y
W
L
I
I
R
L
P
312
                   
                   
I
L
F
A
I
G
V
N
F
L
322
           
 
      
                   
I
F
V
R
V
I
A
I
V
V
332
                   
                   
S
K
L
K
A
N
L
M
C
K
342
                   
TM6              
T
D
I
K
C
R
L
A
K
S
352
         
 
    
 
  
                   
T
L
T
L
I
A
L
L
A
T
362
 
                  
                   
V
E
V
I
F
A
F
V
M
D
372
                   
ECL3 TM7      
E
H
A
R
G
T
L
R
F
I
382
                   
                   
K
L
F
T
E
L
S
F
T
S
392
                   
                   
F
Q
G
L
M
V
A
I
L
Y
402
   
 
              
      H8          
C
F
A
N
N
E
V
Q
L
E
412
                   
                   
F
R
K
S
W
E
R
W
R
L
422
                   
 
                     
E
H
L
H
I
Q
R
D
S
S
 
432
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PreScission
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
BRIL (b562R
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10)      

SCHEMATIC

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
N-term
 
TM1
 
ICL1
 
TM2
 
 
 
 
 
 
ECL1
 
 
 
TM3
 
 
ICL2
 
TM4
 
 
 
 
 
ECL2
 
 
 
TM5
 
ICL3
 
 
 
 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
 
TM7
 
H8
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
C-term

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
GP67 s
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Strep
 
 
 N-term
 
TM1
 
ICL1
 
TM2
 
 
 
 
 
 
ECL1
 
 
 
TM3
 
 
 
ICL2
 
TM4
 
 
 
 
 
ECL2
 
 
 
TM5
 
ICL3
 
 
 
 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
 
 
TM7
 
 
H8 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PreSci
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
BRIL (
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10


DIAGRAMS

ICL1 R H L H ICL1ECL1 T A A Q Q H Q W D G L L S Y Q D S ECL1ICL2 S V L ICL2ECL2 D E G C W T R N S ECL2ICL3 M ICL3ECL3 D E H A R ECL3N-term M A G A P G P L R L A L L L L G M V G R A G P R P Q G A T V S L W E T V Q K W R E Y R R Q C Q R S L T E D P P P A T D L F C N R T F D E Y A C W P D G E P G S F V N V S C P W Y L P W A S S V P Q G H V Y R F C T A E G L W L Q K D N S S L P W R D L S E C E E S K R G E R S S P N-termC-term S M K P L K C P T S S L S S G A T A G S S M Y T A T C Q A S C S C-term E E Q L L F L Y I I Y T V G Y A L S F S A L V I A S A I L L G F C T R N Y I H L N L F A S F I L R A L S V F I K D A A L K W M Y S L S C R L V F L L M Q Y C V A A N Y Y W L L V E G V Y L Y T L L A F S E Q W I F R L Y V S I G W G V P L L F V V P W G I V K Y L Y E N M N Y W L I I R L P I L F A I G V N F L I F V R V I C I V V S K L K A N L C K T D I K C R L A K S T L T L I P L L G T H E V I F A F V M G T L R F I K L F T E L S F T S F Q G L M V A I L Y C F V N N E F R K W R L I Q R V Q L E S W E R E H L H D S

MUTATIONS

Position Wild-type Mutated
207 |  T E
211 |  Q A
215 |  D R
232 |  L F
260 |  L F
295 |  G A
298 |  T A
329 |  C A
358 |  P A
361 |  G A
363 |  H V
405 |  V A

DELETIONS

  • from 1 to 23
  • from 433 to 463

    • MODIFICATIONS


    AUXILIARY PROTEINS

    Protein_type: signal

    Name: GP67 signal
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_0 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: Strep II
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_1 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: prot_cleavage

    Name: PreScission site (3C)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_2 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: fusion

    Name: BRIL (b562RIL)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_3 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: His(10)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_4 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    EXPRESSION

    Expression method Host cell type Host cell Remarks
    Baculovirus Sf9 Insect Bac-to-Bac Baculovirus, pFastBac1

    SOLUBILIZATION

    Solvent type Item Concentration
    detergent DDM 2 %w/v

    Remarks:

    PURIFICATION

    Purification type Description
    Proteolysis by HRV 3C protease None
    Deglycosylation by PNGase F None

    Remarks:None

    CRYSTALLIZATION

    METHOD: vapour diffusion
    TYPE: Sitting drop ()
    PROTEIN CONCENTRATION: 3 mg/ml
    Temperature: 10°C
    ph : 8.0-9.0

    Remarks:

    Chemical lists

    Type Item Concentration
    Detergent
    detergent OTG (n-octyl-β -d-thioglucoside 0.3 % w/v
    Additive
    POPG [1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1′ -rac-glycerol] 2 %w/v
    Precipitant
    PEG 200 32–44 % v/v
    Buffer
    Tris-HCl pH 8.0–9.0 100.0 mM