cnr1_human

NAME

5U09

ORGANISM

Human (Homo sapiens)

PROTEIN NAME

cnr1_human

SOURCE

SWISSPROT

SEQUENCE

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term        
M
K
S
I
L
D
G
L
A
D
10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
T
T
F
R
T
I
T
T
D
L
20
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
L
Y
V
G
S
N
D
I
Q
Y
30
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
E
D
I
K
G
D
M
A
S
K
40
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
L
G
Y
F
P
Q
K
F
P
L
50
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
T
S
F
R
G
S
P
F
Q
E
60
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
K
M
T
A
G
D
N
P
Q
L
70
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
V
P
A
D
Q
V
N
I
T
E
80
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
                   
F
Y
N
K
S
L
S
S
F
K
90
 
                  
                   
E
N
E
E
N
I
Q
C
G
E
100
                   
                   
N
F
M
D
I
E
C
F
M
V
110
                   
  TM1            
L
N
P
S
Q
Q
L
A
I
A
120
                   
                   
V
L
S
L
T
L
G
T
F
T
130
                   
                   
V
L
E
N
L
L
V
L
C
V
140
                   
        ICL1    
I
L
H
S
R
S
L
R
C
R
150
                   
TM2              
P
S
Y
H
F
I
G
S
L
A
160
                   
                   
V
A
D
L
L
G
S
V
I
F
170
                   
                   
V
Y
S
F
I
D
F
H
V
F
180
                   
ECL1 TM3      
H
R
K
D
S
R
N
V
F
L
190
                   
                   
F
K
L
G
G
V
T
A
S
F
200
                 
 
                   
T
A
S
V
G
S
L
F
L
T
210
                   
                   
A
I
D
R
Y
I
S
I
H
R
220
                   
ICL2            
P
L
A
Y
K
R
I
V
T
R
230
                   
TM4              
P
K
A
V
V
A
F
C
L
M
240
                   
                   
W
T
I
A
I
V
I
A
V
L
250
                   
        ECL2    
P
L
L
G
W
N
C
E
K
L
260
                   
                   
Q
S
V
C
S
D
I
F
P
H
270
                   
  TM5            
I
D
E
T
Y
L
M
F
W
I
280
                   
                   
G
V
T
S
V
L
L
L
F
I
290
                   
                   
V
Y
A
Y
M
Y
I
L
W
K
300
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
A
H
S
H
A
V
R
M
I
Q
310
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
    ICL3        
R
G
T
Q
K
S
I
I
I
H
320
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
T
S
E
D
G
K
V
Q
V
T
330
 
 
                
  TM6            
R
P
D
Q
A
R
M
D
I
R
340
                   
                   
L
A
K
T
L
V
L
I
L
V
350
                   
                   
V
L
I
I
C
W
G
P
L
L
360
                   
                   
A
I
M
V
Y
D
V
F
G
K
370
                   
ECL3 TM7      
M
N
K
L
I
K
T
V
F
A
380
                   
                   
F
C
S
M
L
C
L
L
N
S
390
                   
                   
T
V
N
P
I
I
Y
A
L
R
400
                   
H8                
S
K
D
L
R
H
A
F
R
S
410
                   
      C-term  
M
F
P
S
C
E
G
T
A
Q
420
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
P
L
D
N
S
M
G
D
S
D
430
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
C
L
H
K
H
A
N
N
A
A
440
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
V
H
R
A
A
E
S
C
I
450
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
K
S
T
V
K
I
A
K
V
T
460
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
M
S
V
S
T
D
T
S
A
E
470
 
 
   
A
L
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
hemagglutin
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG            
 
  
  N-term
 
K
90
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                
                 
E
N
E
E
N
I
Q
C
G
99
                   
                   
E
N
F
M
D
I
E
C
F
M
109
                   
    TM1          
V
L
N
P
S
Q
Q
L
A
I
119
                   
                   
A
V
L
S
L
T
L
G
T
F
129
                   
                   
T
V
L
E
N
L
L
V
L
C
139
                   
          ICL1  
V
I
L
H
S
R
S
L
R
C
149
                   
TM2              
R
P
S
Y
H
F
I
G
S
L
159
                   
                   
A
V
A
D
L
L
G
S
V
I
169
                   
                   
F
V
Y
S
F
I
D
F
H
V
179
                   
ECL1   TM3    
F
H
R
K
D
S
R
N
V
F
189
                   
                   
L
F
K
L
G
G
V
T
A
S
199
                   
                   
F
T
A
S
V
G
S
L
F
L
209
 
                  
                   
A
A
I
D
R
Y
I
S
I
H
219
                   
  ICL2          
R
P
L
A
Y
K
R
I
V
T
229
                   
TM4              
R
P
K
A
V
V
A
F
C
L
239
                   
                   
M
W
T
I
A
I
V
I
A
V
249
                   
          ECL2  
L
P
L
L
G
W
N
C
E
K
259
                   
                   
L
Q
S
V
C
S
D
I
F
P
269
                   
    TM5          
H
I
D
E
T
Y
L
M
F
W
279
                   
                   
I
G
V
T
S
V
L
L
L
F
289
                   
                   
I
V
Y
A
Y
M
Y
I
L
W
299
   
 
     
K
A
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PGS (Pyroco
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                 
TM6            
D
Q
A
R
M
D
I
R
L
341
                   
                   
A
K
T
L
V
L
I
L
V
V
351
                   
                   
L
I
I
C
W
G
P
L
L
A
361
                   
                   
I
M
V
Y
D
V
F
G
K
M
371
                   
TM7              
N
K
L
I
K
T
V
F
A
F
381
                   
                   
C
S
M
L
C
L
L
N
S
T
391
                   
                   
V
N
P
I
I
Y
A
L
R
S
401
                   
H8                
K
D
L
R
H
A
F
R
S
M
411
                   
 
    C-term      
F
P
S
C
E
G
T
A
Q
P
 
421
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10)      

SCHEMATIC

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term
 
TM1
 
ICL1
 
TM2
 
ECL1
 
 
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
ECL2
 
 
 
 
 
 
 
TM5
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ICL3
 
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
C-term

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
hemagg
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG
      
 
  
 
 
TM5 


DIAGRAMS

ICL1 R S L R C ICL1ECL1 F H R K D ECL1ICL2 P L A Y K R I V ICL2ECL2 W N C E K L Q S V C S D I F P H I ECL2ICL3 T Q K S I I I H T S E D G K V Q V T R ICL3ECL3 K M ECL3N-term M K S I L D G L A D T T F R T I T T D L L Y V G S N D I Q Y E D I K G D M A S K L G Y F P Q K F P L T S F R G S P F Q E K M T A G D N P Q L V P A D Q V N I T E F Y N K S L S S F K E N E E N I Q C G E N F M D I E C F M V L N-termC-term S C E G T A Q P L D N S M G D S D C L H K H A N N A A S V H R A A E S C I K S T V K I A K V T M S V S T D T S A E A L C-term N P S Q Q L A I A V L S L T L G T F T V L E N L L V L C V I L H S R P S Y H F I G S L A V A D L L G S V I F V Y S F I D F H V S R N V F L F K L G G V T A S F T A S V G S L F L T A I D R Y I S I H R T R P K A V V A F C L M W T I A I V I A V L P L L G D E T Y L M F W I G V T S V L L L F I V Y A Y M Y I L W K A H S H A V R M I Q R G P D Q A R M D I R L A K T L V L I L V V L I I C W G P L L A I M V Y D V F G N K L I K T V F A F C S M L C L L N S T V N P I I Y A L R S K D F R S L R H A M F P

MUTATIONS

Position Wild-type Mutated
210 |  T A

DELETIONS

  • from 1 to 89
  • from 302 to 332
  • from 422 to 472

    • MODIFICATIONS


    AUXILIARY PROTEINS

    Protein_type: signal

    Name: hemagglutinin
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_0 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: FLAG
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_1 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: prot_cleavage

    Name: TEV protease
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: Within Receptor_2 91:91
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: fusion

    Name: PGS (Pyrococcus abyssi glycogen synthase)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: Within Receptor_1 302:332
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: His(10)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_1 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    EXPRESSION

    Expression method Host cell type Host cell Remarks
    Baculovirus Sf21 Insect Bac-to-Bac

    SOLUBILIZATION

    Solvent type Item Concentration
    detergent DDM 1.0 %w/v
    additive CHS 0.2 %w/v
    additive Glycerol 10.0 %

    Remarks:

    PURIFICATION

    Purification type Description
    Proteolysis by TEV protease None
    Deglycosylation by PNGase F None
    Detergent was exchanged from 0.05% DDM to 0.05% lauryl maltose neopentyl glycol (LMNG) None

    Remarks:None

    CRYSTALLIZATION

    METHOD: in meso/LCP
    TYPE: lipidic cubic phase (LCP) (monoolein (9.9 MAG))
    PROTEIN CONCENTRATION: 55 mg/ml
    Temperature: 20°C
    ph : 5.5-5.5

    Remarks:

    Chemical lists

    Type Item Concentration
    Detergent
    detergent LMNG 0.05 %(w/v)
    Lipid
    lipid CHS 0.002 %(w/v)
    Buffer
    HEPES pH 7.5 25.0 mM
    Precipitant
    PEG 400 31.0 % v/v
    Additional
    sodium citrate 100.0 mM
    magnesium sulfate 100.0 mM